اندازه گیری ثابت تمایل (افینیتی) آنتی بادی مونوکلونال igg ضد آنزیم الکالین فسفاتاز با استفاده از روش الیزا
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: افینیتی آنتی بادی به آنتی ژن در بسیاری از موارد تاثیر بیولوژیکی مهمی در فعالیت آن آنتی بادی و همچنین در انجام سنجشهای آزمایشگاهی ایمونولوژیکی مانند رادیوایمونواسی (ria) و ایمونوهیستوشیمی دارد. مطالعه حاضر با هدف سنجش افینیتی آنتی بادی مونوکلونال محصول کلون هیبریدومای a1g8f7 تولید شده نسبت به آنزیم آلکالین فسفاتاز (alp) انجام گردید.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، روشهای متعددی برای تعیین افینیتی و آویدیتی آنتی بادی تا کنون ابداع شده اند. در همه این روشها از سیستمی استفاده شده که در آن آنتی ژن و آنتی بادی با هم به تعادل برسند و آنگاه بدون تغییر دادن حالت تعادل، مقادیر آنتی ژن آزاد و آنتی ژن همراه شده با آنتی بادی سنجیده می شود. در این تحقیق از یک روش سریع الیزای رقابتی - که افینیتی آنتی بادی را در حالت محلول اندازه گیری می کند - برای سنجش میل پیوندی آنتی بادی مونوکلونال igg ضد آلکالین فسفاتاز تولید شده از کلون a1g8f7 استفاده شد.یافته ها: غلظت ثابت آنتی بادی برای استفاده در الیزای اختصاصی مرحله دوم تعیین dissociation constant (kd) به روش کلاتز، توسط یک الیزای رقابتی برابر 1µg به دست آمد؛ با رسم نمودار کلاتز kd کلون a1g8f7 برابر 3.8×10-9 تخمین زده شد.نتیجه گیری: با توجه به این که kd آنتی بادی های طبیعی بدن برای بیشتر آنتی ژن ها بین 10-7 الی 10-11 متغیر است و با توجه به این که هر چه اندازه kd کوچکتر باشد، افینیتی آنتی بادی بیشتر خواهد بود، آنتی بادی ترشحی از کلون a1g8f7 برای بیشتر سنجشهای ایمونولوژیکی مناسب به نظر می رسد. عملا در آزمایشهای ایمونوسیتوشیمی و ایمونوهیستوشیمی که با این آنتی بادی مونوکلونال - همراه با آنزیم alp در لایه سوم - انجام گردید، نتیجه رنگ آمیزی بسیار عالی و قابل مقایسه با نمونه مشابه تجارتی apaap) شرکت (dako بود.
منابع مشابه
اندازه گیری ثابت تمایل (افینیتی) آنتی بادی مونوکلونال IgG ضد آنزیم الکالین فسفاتاز با استفاده از روش الیزا
Background and Aim: The affinity of an antibody with its antigen is a crucial parameter in its biological activity and carrying out immunologic tests such as radioimmunoassay (RIA) and immunohistochemistry. This study was done in our laboratory at Tarbiat Modarres University to measure the affinity constant of specific monoclonal antibodies/MAB (A1G8F7) with alkaline phosphatase enzyme produced...
متن کاملتهیه ی کانژوگه پراکسیداز آنتی بادی مونوکلونال ضد igg مرغ و ارزیابی آن به وسیله الیزا
میکروارگانیسم های بیماری زا از عوامل اصلی تلفات و خسارت های اقتصادی در صنعت طیور هستند. به دلیل تأثیر این عوامل بر صنعت طیور کیت های آزمایشگاهی مختلفی بر پایه الیزا برای تشخیص عفونت های حاصل از این عوامل طراحی شده اند. در این کیت ها اغلب از یک آنتی بادی ثانویه ی کانژوگه شده با آنزیم به منظور شناسایی igg مرغ استفاده می شود. هدف از مطالعه ی حاضر نشان دار کردن یک آنتی بادی مونوکلونال ضد igg مرغ با...
15 صفحه اولتهیه و ارزیابی آنتی بادی ضد igg گاو با استفاده از پروتئین نوترکیب ناحیه ثابت زنجیر سنگین igg گاو
anti-bovine (پادتن ضد پادتن گاو) در آزمایش های سرمی کاربرد زیادی دارد که برای تهیه آن به طور معمول پادتن خالص شده گاو به گونه دیگری(گوسفند، خرگوش و غیره) تزریق می گردد. در این مطالعه تلاش گردید با تغییر میزبان، طول زمان و درجه حرارت کشت، بهترین شرایط بیان پروتئین نوترکیب ناحیه ثابت زنجیر سنگین igg گاو برآورد گردد، سپس پروتئین فیوژن تولید شده در شرایط بهینه با استفاده از روش کروماتوگرافی خالص سا...
15 صفحه اولطرح بررسی آنتی بادی ضد طاعون گاوی با استفاده از آنتی ژن سرخک (هماگلوتینین) و مقایسه آن با روش سرونوترالیزاسیون
متن کامل
طراحی یک روش الایزا با استفاده از آنتی ژن های سطحی اسپرم جهت اندازه گیری آنتی بادی ضد اسپرم و مقایسه آن با تست spermmar
مقدمه: تاثیر آنتی بادی ضداسپرم با میزان شیوع 26-6% در ایجاد ناباروری به خوبی شناخته شده است. لذا اندازه گیری آن در سرم و یا مایعات بیولوژیک مردان و زنان از اهمیت کلینیکی برخوردار است. امروزه یکی از مهمترین موضوعات مورد بحث در ناباروری ایمونولوژیک، طراحی روشی استاندارد جهت اندازه گیری asa می باشد. مطالعات انجام شده نشان می دهند که روش الایزا در بین روش های تشخیص asa، در صورتی که از آنتی ژن های س...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجندجلد ۱۱، شماره ۴، صفحات ۹-۱۵
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023